- Técnica histológica
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Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada, a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio, posibilitando la observación de estructuras no visibles al ojo humano.
Contenido
Pasos de la Técnica histológica
- Obtención del material histológico para estudiar
- Proceso de fijación
- Lavados
- Deshidratación
- Aclaramiento
- Infiltración
- Inclusión
- Microtomía
- Tinción
- Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histologica por varios autores)
Obtención del material histológico
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:
- Biopsia
- Abiopsia
- Necropsia (llamada vulgarmente autopsia)
Fijación
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem Unos de los fijadores más usado es el Formol al 10% (Formaldehido). En el caso de que utilicemos más adelante el microscopio electrónico, usaremos glutaraldehido (proteínas) u osmio (lípidos).
Lavados
Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador
Deshidratación
Suena incoherente que se deba lavar el tejido y después deshidratarlo. El exceso de fijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomia, podría afectar los cortes, por eso se debe lavar. La deshidratación se hace con el uso de alcohol de una menor concentración a una mayor.
Aclaramiento
En este paso el se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina lo más usado es el Xilol (Xileno) ya que como esta deshidratado el xilol entrará hasta lo más profundo del tejido. También el tejido pierde color hasta un tono acaramelado.
Infiltración
En este paso la muestra se coloca en parafina liquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histológica, como se ha dicho en el paso anterior el tejido esta completamente lleno de xilol, ahora debido a osmosis sale el xilol y entra la parafina.
La deshidratación, Aclaramiento e Infiltración se pueden realizar manualmente pero hoy en día existe una máquina que lo puede realizar.
Inclusión
Aquí se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques están las muestras a estudiar. hay maquinas especializadas para la inclusión en parafina de tejidos. Después que se incluyeron los bloques y por conseunte se dejaron secar, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte.
Microtomia
Se realizan cortes muy delgados que van de acuerdo a lo requerido o costumbre del laboratorio donde se realice la técnica, los cortes van desde .5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al baño de flotacion y se ´pescan´ con un portaobjetos, se marca con la fecha, el tejido que es y con que tincion se va a procesar. El ángulo de corte entre el cuchillo y el bloque ha de ser entre 10º y 15º. Una vez realizado el corte se da un baño de agua destilada, para que la parafina se estire. Un buen corte histológico debe tener un grosor en torno a 3-5 micras. si
Tinción
Hay muchos tipos de tinciones para diferenciar en los tejidos diferentes estructuras o sustancias.
La tincion más usada o también llamada "De Rutina" es la de Hematoxilina y Eosina (HyE) esta usa un colorante llamado Hematoxilina en su composición según Harris que tiñe las sustacias ácidas o que las contengan, como el núcleo que contiene el Ácido Desoxirribonúcleico (ADN) La Eosina Amarillenta tiñe las estructuras básicas como el citoplasma y demás organelos
Otra tinción muy usada es la de papanicolau Usa colorantes como:
- OG6
- EA50
- Hematoxilina de Harris o Básica según el caso
Esta tincion es muy usada para teñir excresiones corporales como saliva, orina, etc. (La sangre NO es una excresion)
Como se menciono anteriormente hay muchas tinciones Otros ejemplos son:
- Masson
- PASCHIFF
- Perls
- Plata Metenamina
- Warthin-Starry
- Ziehl-Neelsen
- Van Gieson
- Azul Alciano
- Sudan III
- Rojo Congo
Entre muchas otras tinciones...
En este paso después de teñir se monta, es decir se coloca un cubreobjetos y se ´pega´con resina. Cabe mencionar que alguna gente toma como un paso más de la Técnica Histológica el montar las muestras.
Observación
Como se menciono al principio algunos autores no toman la observacion como un paso de la Técnica Histológica pero es bueno mencionarla Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite ver para dar un diagnostico.
La Técnica Histológica se realiza en todos los hospitales para hacer diagnosticos de distintas enfermedades, como para saber si un tumor es maligno o beningno. etc.
Véase también
Bibliografía Histología Métodos e instrumentos de estudio de la Histología Parte I Técnica Histológica, Guía de Actividad Nº1 2005, Prof. Titular: Dra. O. Z. de Gorodner, Prof. Adjunta: Dra. R. R. de Godoy, Facultad de Medicina de la Universidad Nacional del Noreste.
Enlaces externos
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- Histology for Dummies Histología humana en español
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