- Tiocianato de guanidinio
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El tiocianato de guanidinio (GITC) es un compuesto químico utilizado como degradante de proteínas en general, es un agente caotrópico , aunque es más comúnmente utilizado en la extracción de ADN y ARN.[1]
Este compuesto también puede ser reconocido como tiocianato de guanidina. Esto se debe a guanidinio que es el ácido conjugado de guanidina y se le llama catión guanidinio , que se representa: [CH 6 N 3] +.
El Tiocianato de guanidinio se puede utilizar para desactivar el virus de la gripe causado en 1918 conocida como " gripe española "de modo que se puede estudiar de forma segura. Esta aplicación es, gracias a su funcion como desnaturalizante.
El Tiocianato de guanidinio también es utilizado para alisar las células y partículas de virus en el ARN y las extracciones de ADN, donde su función, además de su acción de lisis, es evitar que actuen las enzimas RNasa y DNasa por la desnaturalización. Estas enzimas de lo contrario podría dañar el extracto.
Un método muy utilizado es guanidinio tiocianato-fenol-cloroformo . No es estrictamente necesario el uso de fenol o cloroformo, si la extracción de ARN de transferencia de Northern o de ADN para el análisis de Southern blot debido a que la electroforesis en gel seguida de la transferencia a una membrana se separa el ADN / ARN de las proteínas. Además, puesto que estos métodos utilizan sondas para unirse a sus conjugados, los péptidos que pasan por el proceso por lo general no importa a menos que un péptido sea un RNasa o DNasa, y sólo si la enzima se las arregla para su renaturalización, que no debería ocurrir si los protocolos adecuados se siguen. Una posible excepción podría ser cuando se trabaja con los extremófilos de temperatura debido a que algunas enzimas de estos organismos pueden permanecer estables bajo circunstancias extraordinarias.[2]
Referencias
- ↑ P. E. Mason; G. W. Neilson; C. E. Dempsey; A. C. Barnes; J. M. Cruickshank (15 de abril de 2003). «The hydration structure of guanidinium and thiocyanate ions: Implications for protein stability in aqueous solution» (en inglés). PNAS 100 (8): pp. 4557-4561. doi:. http://www.pnas.org/content/100/8/4557.full.
- ↑ Shimomura O; Masugi T; Johnson FH; Haneda Y (21 de marzo de 1978). «Properties and reaction mechanism of the bioluminescence system of the deep-sea shrimp Oplophorus gracilorostris» (en inglés). Biochemistry 17 (6): pp. 994-8. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/629957.
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