Método de Miles y Misra

El método de Miles y Misra o conteo variable en superficie es una técnica utilizada para calcular el número de unidades formadoras de una colonia en una suspensión bacteriana. Fue descubierto por Miles y Misra en 1938.

El procedimiento de la técnica es el siguiente:

• Se preparan una serie progresiva de diluciones en serie de la suspensión bacteriana original, tantas como sean necesarias.
• Los materiales necesarios son una micropipeta correctamente calibrada que pueda surtir gotas de 0.02ml y 6 placas de agar nutritivo. Estas placas se dividen en sectores numerados.
• La suspensión o dilución se coloca en forma de gotas (0.02ml) desde una altura de 2,5 cm; ésta se dispersará aproximadamente en un área de 1.5 a 2.0 cm de diámetro.
• Cada una de las 6 placas tendrá una gota de cada dilución en el sector correspondiente (numerado)
• Periodo de incubación: 18-24 horas. Posteriormente, se observa su crecimiento.
• Los sectores en los que hay más de 20 colonias no muestran confluencia y son utilizados para realizar los conteos de viabilidad.
• El número de bacterias viable por 0.02ml de una dilución se obtiene calculando la media de los contajes para cada dilución en las 6 placas.

Referencias

• Miles, A.A & Misra, S.S. (1938). J. Hyg. (London), 38, 732.