Inmunoensayo

Inmunoensayo es un conjunto de técnicas inmunoquímicas analíticas de laboratorio que tienen en común el usar complejos inmunes, es decir los resultantes de la conjugación de anticuerpos y antígenos, como referencias de cuantificación de un analito (sustancia objeto de análisis) determinado, que puede ser el anticuerpo (Ac) o un antígeno (Ag), usando para la medición una molécula como marcador que hace parte de la reacción con el complejo inmune en la prueba o ensayo químico.

La técnica se basan en la gran especificidad y afinidad de los anticuerpos por sus antígenos específicos y se usan los anticuerpos monoclonales (obtenidos en el laboratorio) o de sueros policlonales (obtenidos de animales), siendo más específicos los monoclonales.

Su gran sensibilidad y especificidad permite la cuantificación de compuestos presentes en líquidos orgánicos en concentración reducida, del orden de nanogramos/ml o de picogramos/ml.

El desarrollo del inmunoensayo ha tenido gran impacto en el campo del diagnostico médico mediante pruebas de laboratorio o química clínica.

Tipos

Por la técnica de medición

• Competitivo: el Antígeno (Ag) objeto de la medición compite con un antígeno marcado por un anticuerpo (Ac). Se mide por la cantidad del antígeno marcado sin conjugar que se considera es inversamente proporcional al analito.

• No competitivo (llamado también tipo sándwich): el Ag de la muestra reacciona con dos Ac diferentes que se fijan a distintas partes del Ag . Uno de los Ac generalmente está en soporte sólido para facilitar la separación de la fracción ligada, y el otro Ac lleva la marca. Se mide por la cantidad del marcador considerando que es directamente proporcional a la cantidad del analito.

Por el medio donde se realiza la medición

• Homogéneo: En este tipo de ensayo la señal generada por la unión del antígeno y el anticuerpo se mide directamente en el mismo medio que se utiliza para favorecer la formación del complejo inmune.

• Heterogéneo: En este tipo de ensayo la señal generada por la unión del antígeno y el anticuerpo se mide en un medio diferente que el utilizado para la unión del complejo inmune, generalmente implican una etapa intermedia de lavado para eliminar interferencias.

Se considera que los inmunoensayos con formato homogéneo no competitivo son los más sensibles y específicos.

Por el marcador

• Radioinmunoensayo (RIA) : el marcador es un isótopo radioactivo.
• Enzimoinmunoanálsis (EIA): el marcador es una enzima como por ejemplo la técnica de enzimoinmunoensayo conocido por su abreviatura ELISA.
• Fluoroinmunoanálisis: el marcador es una molécula fluorescente, por ejemplo FPIA.
• Ensayo Inmunoquimioluminiscente: la marca es en general una enzima capaz de catalizar una reacción quimioluminiscente. Son tanto o mas sensibles que los radioinmunoensayos, y no presentan riesgos de manipulación de sustancias radioactivas. En contraposición estan poco desarrollados y no siempre es posible aplicarlos.

Usos

• Medición de niveles de hormonas: por ejemplo la medición de niveles de hormonas tiroideas o de estrógenos
• Medición de metabolitos en suero cuya cantidad o presencia son indicios de daño celular: Por ejemplo la medición de marcadores biológicos miocárdicos como las troponinas
• Detección de virus: por ejemplo de los causantes de hepatitis y su individualización
• Detección del cáncer o de células tumorales: a través de sus proteínas o marcadores tumorales, liberados en el suero de los pacientes.
• Detectar exposición a agentes infecciosos: por ejemplo de rubéola o toxoplasmosis en mujeres embarazadas o en personas inmunosuprimidas.
• Detección de metabolitos indicadores de problemas fisiológicos, por su presencia o cantidad excesiva, en la sangre : por ejemplo en caso de anemia se mide niveles de ferritina.
• Medir niveles de medicamentos, drogas objeto de abuso y toxinas en sangre.

Bibliografía

• M J Castieiras Lacambra, X Fuentes Arderiu, J. M. Queraltó Compañó. Bioquímica clínica y patología molecular, Volumen 1. Editor Reverte, 1997. ISBN 8429118543, 9788429118544.
• Andrade, Amalia - Metodologías en el laboratorio clínico: El Inmunoensayo. Capítulo 53. Endocrinología. Víctor M. Arce, Pablo F. Catalina, Federico Mallo editores. Editorial Univ Santiago de Compostela, 2006. ISBN 84-9750-622-7, 9788497506229. [1]

• Introducción a los inmunoensayos- Laboratorios Abbot. [2]